Gemodificeerd Spike-mRNA: er zijn geen 'gewenste eiwitten'

Alle schade als gevolg van de injecteerbare COVID-19-producten was voorspelbaar en te voorkomen.

Jessica Rose, PhD

A NATUUR publicatie door Mulroney et al. gerechtigd N¹-methylpseudouridylatie van mRNA veroorzaakt +1 ribosomale frameshifting was gepubliceerd op 6 december 2023. De auteurs toonden aan dat N1-methylpseudouridine de betrouwbaarheid van de mRNA-translatie beïnvloedt via het blokkeren van het ribosoom, wat resulteert in de productie van meerdere, unieke en potentieel afwijkende eiwitten door frameshifting.

Om de zorgen in verband met deze bevindingen weg te nemen, heeft Wiseman c.s.. snel opgeschreven Ribosomale frameshifting en verkeerde lezing van mRNA in COVID-19-vaccins produceert ‘off-target’-eiwitten en immuunreacties die veiligheidsproblemen oproepen: commentaar op Brits onderzoek door Mulroney et al..

Een deel van de zorgen komt voort uit de codonoptimalisatie van de gemodificeerde mRNA’s voor gebruik in de COVID-19-producten. Codonoptimalisatie werd uitgevoerd om maximale eiwitexpressie bij mensen te bereiken. Het is gebaseerd op het feit dat specifieke organismen er de voorkeur aan geven specifieke codons te gebruiken, de zogenaamde codon bias. We kunnen maak gebruik van codon-bias door mRNA's te maken volgens de gebruikte eiwitgastheerproducent synoniem codonvervanging, om de translationele efficiëntie te verhogen en eiwit expressie, zonder te veranderen de sequentie van het eiwit.

Het is echter bekend dat codon-optimalisatie kan leiden tot eiwitconformatie-, vouw- en stabiliteitsproblemen, waardoor dit mogelijk is ontwrichten de verfijnde timing van translatie en uiteindelijk de eiwitfunctie. Codonoptimalisatie kan ook leiden tot het verkeerd opvouwen van mRNA's vanwege verhoogd Guanine/Cytosine (GC-gehalte) in de geoptimaliseerde versie mRNA.

Synonieme codonvervanging resulteert ook in een verandering in de multifunctionele regulerende en structurele rollen die daaruit voortkomen eiwitten.

Er is, eigenlijk, een aanzienlijke verrijking van het GC-gehalte (respectievelijk 17% en 25% verrijkingen volgens Pfizer en Moderna, vergeleken met SARS-CoV-2) als resultaat van de codonoptimalisatie die dat was gedaan, en “dit kan leiden tot ziekte-geassocieerde cellulaire pathologieën waarbij G4-quadruplexen betrokken zijn” die verband houden met prionziekten. Verhoogde GC-inhoud aanzienlijk leeftijd Ook de secundaire structuur van mRNA, en dit kan ook leiden tot het pauzeren of blokkeren van ribosomen.

Naast de verwachte problemen met codonoptimalisatie, zorgt de vervanging van alle uridines door N1-methylpseudoridines in het mRNA dat wordt gebruikt voor de productie van de injecteerbare COVID-19-producten voor een hogere ontrouwvertaling van eiwitten. De auteurs beweren dat gladde sequenties – lange runs van N1-methylpseudoridines – frameshifting veroorzaken, waarbij het ribosoom eenvoudigweg over deze sequenties glijdt om het leesraam te verschuiven en totaal andere eiwitten te produceren. Volgens hun bevindingen gebeurde dit ongeveer 8% van de tijd. Als we deze bevinding contextualiseren naar de in vivo In de menselijke omgeving zijn de aantallen afwijkende eiwitten die mogelijk geproduceerd worden, duizelingwekkend.

Een artikel van de Universiteit van Cambridge getiteld Onderzoekers herontwerpen toekomstige mRNA-therapieën om potentieel schadelijke immuunreacties te voorkomen werd ook opgeschreven. De boodschap uit deze samenvatting was dat het gemodificeerde mRNA COVID-19-productplatform kan worden gered door simpelweg de gladde sequenties die verantwoordelijk zijn voor de frame-shift te verbeteren, door ze te targeten en de gladde codons te muteren.

Ik zou niet aanraden om van deze zeer gladde helling af te glijden.

Een opmerking over on- en off-target eiwitproductie

Ik kan het tenminste bedenken twee potentieel dreigende problemen met betrekking tot de eiwitproductie in de context van de door COVID-19 gemodificeerde mRNA-producten.

1. On-target-eiwitten worden met hoge betrouwbaarheid geproduceerd
2. Off-target-eiwitten worden met lage betrouwbaarheid geproduceerd

Het potentieel voor amyloïdogene eiwitproductie is aanwezig in de context van on-target eiwitproductie. Er is aangetoond dat een geconserveerd coronavirus-spike-eiwitpeptide amyloïde nanostructuren en hydrogels vormt onder pH-afhankelijke (pH = 4) voorwaarden. Er is ook aangetoond dat een moleculair mechanisme voor potentiële amyloïdogenese van SARS-CoV-2 S-eiwit bij mensen wordt vergemakkelijkt door endoproteolyse door neutrofielen. elastase.

Figuur 1 laat zien dat er ten minste 8 amyloïdogene peptiden in het spike-eiwit zitten volgens de BNT162b2-code. Mijn zorg is dat in de context van high-fidelity-translatie ten minste één van deze peptiden wordt geproduceerd en gesplitst in amyloïdogene peptiden om proteïnopathie te induceren. De mate en het type schade zullen afhangen van de locatie van de eiwitten die worden geproduceerd.

Een nog recenter preprint-artikel dat op 9 december 2023 online is gepubliceerd, toont de spontane vorming aan van de amyloïde-achtige zelfassemblerende nanostructuren van spike- en N-eiwitten die proteïnopathie of proteïnopathie zouden kunnen veroorzaken. amyloïdose. Dit betekent dat het mogelijk is dat piekeiwitten die in de menselijke omgeving worden geproduceerd amyloïden vormen om neurodegeneratie en andere pathologieën te veroorzaken.

Het potentieel voor afwijkende eiwitproductie is ook aanwezig in de context van off-target eiwitproductie, zoals blijkt uit het onlangs gepubliceerde onderzoek NATUUR papier waarnaar hierboven wordt verwezen. De auteurs laten zien dat off-target-eiwitten worden geproduceerd in de context van de door COVID gemodificeerde mRNA-opnamen als gevolg van out-of-frame vertaling. Deze zogenaamde 'frameshifting' wordt waarschijnlijk versterkt door de combinatie van codonoptimalisatie en de vervanging van Uridines door N1-methylpseudouridines.

Het feit dat er off-target-eiwitten worden geproduceerd, is zeer zorgwekkend. Deze eiwitten zouden een onbedoelde immuunrespons tegen eiwitten kunnen veroorzaken die tot auto-immuniteit leidt, vooral in de context van chimere spike-menselijke peptiden.

Door 1. en 2. conceptueel te combineren, zijn hotspots van moleculaire mimicry in het spike-eiwit al ontdekt met auto-immuunpotentieel in de context van trombocytopenie. Een TQLPP-motief in het spike-eiwit heeft vergelijkbare antilichaambindende eigenschappen als het menselijke eiwit trombopoëtine. Antilichamen kruisreacties met trombopoëtine kunnen trombocytopenie veroorzaken, een aandoening die wordt waargenomen bij COVID-19-patiënten. De gemodificeerd mRNA dat codeert voor de piek in de BNT162b2- en Moderna COVID-19-opnamen wordt nagebootst na het piekeiwit van het SARS-CoV-2-virus.

Conclusies

In het licht van dit nieuwe werk van Mulroney el al.is het duidelijk dat deze producten moeten worden teruggeroepen en onderzocht. Het is merkwaardig dat de fabrikanten alle kansen en middelen hadden om de gevaren van off-target eiwitproductie in te schatten, met het oog op de daaropvolgende verbetering – of op zijn minst verlichting – van deze gevaren. voorafgaand miljarden mensen ermee te injecteren, maar hebben deze kansen niet benut.

Misschien moeten we gehoor geven aan de oproep van evolutionair celbioloog Allan Drummond: “Maak alsjeblieft geen grapjes over deze [codon]-sites; ze zijn om de een of andere reden geoptimaliseerd”, verwijzend naar het benutten van codon-bias bij zoogdieren voor optimalisatie.

Ik ben het met Allan Drummond eens.

Stille bewondering is een betere benadering dan stille mutatie, en nederigheid en nederigheid moeten zeker voorrang krijgen op hoogmoed.

Heruitgegeven van de auteur subgroep